PEMBUATAN SAYATAN MELINTANG DAUN DENGAN METODE PARAFIN


Mempelajari atau mengklasifikasi suatu organisme menurut Budhi et al (2008) dilakukan dengan pengamatan ciri-ciri suatu organisme, seperti morfologi, anatomi, fisilogi, histologi, dan lain sebagainya. Menurut Fahn (1982), pengamatan struktur anatomi sangat penting guna pembelajaran serta klasifikasi suatu spesies. Untuk melihat struktur anatomi suatu organisme, dibutuhkan pengamatan mikroskopis. Pengamatan mikroskopis ini dilakukan untuk melihat susunan dan bentuk sel sehingga dapat diketahui ciri khusus yang dimiliki individu dan dikelompokkan bersama spesies dengan tingkat kemiripan tinggi.
Pengamatan anatomi pada tumbuhan dapat dilakukan dengan penyayatan secara konvensional dengan menggunakan silet, atau penyayatan dengan mikrotom. Penyayatan pun tidak dapat dilakukan begitu saja. Sebelumnya, harus diketahui terlebih dahulu bagian yang akan disayat, serta struktur dari organ tersebut. Bila organ berongga atau tipis, maka sebelumnya dapat dilakukan proses embedding atau penanaman organ pada suatu cairan yang dapat mengeras, salah satunya adalah parafin.
Parafinasi menurut Lang (2009) merupakan proses masuknya zat atau cairan parafin pada celah, rongga, maupun sel sebelum proses pemblokan dnegan parafin itu sendiri. Proses ini disebut juga dengan infiltrasi parafin. Penggunaan parafin mengharuskan organ dalam keadaan tanpa kandungan air, karena zat parafin yang non polar sehingga tidak dapat bercampur dengan air yang polar. Hal tersebut membuat parafin tidak dapat masuk ke dalam jaringan. Sehingga dilakkan dehidrasi terlebih dahulu yang biasanya menggunakan larutan alkohol. Tahap dehidrasi inilah yang sering dimodifikasi mengingat jaringan tumbuhan yang lebih sulit diinfiltrasi oleh parafin sehingga membutuhkan waktu yang cukup lama.
Suzuki et al. (2002) menyampaikan bahwa sebelum tahap parafinasi, dibutuhkan persiapan jaringan atau organ terlebih dahulu. Tahapan (gambar 1) yang perlu diperhatikan adalah tahap pencucian, fiksasi, kemudian barulah tahap dehidrasi. Ketiga tahap ini menggunakan larutan yang berbeda sesuai dnegan kebutuhan organ atau jaringan yang digunakan. Setelah itu, masuk ke tahap infiltrasi, kemudian pemblokkan dengan cairan parafin konsentrasi tinggi. Pembuatan blok ini ditujukan untuk membantu agar rongga-rongga organ terisi dan menjadi keras, sehingga dapat dilakukan penyayatan dengan mudah tanpa merusak organ.

Gambar 1 Proses pembuatan sayatan daun

Praktikum mikroteknik tumbuhan salah satunya menggunakan daun Acacia sp. (gambar 2). Proses fiksasi sampai embeddingmasing-masing dilakukan selama satu minggu. Setelah proses embedding dilakukan, masing-masing daun dipotong atau disayat menggunakan mikrotom untuk mendapatkan sayatan melintang dengan ketebalan 10µm-12µm. Hasil sayatan akan menyerupai pita yang kemudian diletakkan pada kaca preparat yang telah dioles dengan albumin kemudian ditetesi oleh air. Keberdaan air mencegah agar pita sayatan tidak langsung menepel pada kaca, sehingga dapat diatur posisinya terlebih dahulu. Kemudian akan merekat pada kaca preparat karena adanya albumin. Menurut SC (2008), albumin merupakan cairan yang stabil, dan merupakan pelaku oksidasi yang kuat sehingga penempelan mudah dilakukan. Setelah itu disimpan di atas hot plate untuk menghilangkan air.
Selanjutnya dilakukan tahap pewarnaan ganda dengan safranin dan fast green. Pewarnaan ganda ini dimaksudkan untuk mewarnai dua bagian jaringan yang berbeda. Safranin akan memberi warna merah pada bagian jaringan yang terlignifikasi, sedangkan fast green memberikan warna hijau pada bagian jaringan yang terlignifikasi maupun tidak (Clair et al. 2006). Kemudian pengamatan dengan mikroskop dan optilab dilakukan setelah diberi entelan untuk mengawetkan dan ditutup dengan cover glass. Hasil pengambilan foto meggunakan optilab (gambar 2) cukup baik, sel-selnya juga terlihat jelas. Acacia sp, memiliki lapisan atas dan bawah yang sama, yaitu di bawah lapisan epidermis terdapat jaringan tiang atau palisade.

Gambar 2 Hasil sayatan melintang daun Acacia sp. perbesaran 40x10

DAFTAR PUSTAKA
Budhi GS, Handayani TF, Adipranata R. 2008. Aplikasi pengenalan daun untuk klasifikasi tanaman dengan metode probabilistic neural network. Aplikasi Pengenalan Daun. Seminar Ilmiah Nasional Komputer dan Sistem Intelijen; 2008 20-21 Agustus; Depok, Indonesia. Surabaya (ID): Universitas Kristen Petra Press. hlm 230-235.
Clair B, Ruelle J, Beauchene J, Prevost MF, Fournier M. 2006. Tension wood and opposite wood in 21 tropical rain forest species. IAWA Journal. 27(3): 329-338.
Fahn A. 1982. Plant Anatomy. Oxford (GB): Pergamon Press.
Lang AG. 2009. The use of n-butyl alcohol in the parafin method. Stain Technology. 12(3): 113-117.
[SC] Scholar Chemistry. 2008. Albumin, (Egg). Carlsbad (US): Material Safety Data Sheet Press.
Suzuki M, Katsuyama K, Adachi K, Ogawa Y, Yorozu K, Fuiji E, Misawa Y, Sugimoto T. 2002 Combination of fixation using PLP fixative and embedding in parafin by the AMeX method is useful for histochemical studies in assessment of immunotoxicity. The Jornal of Toxicological Sciences. 27(3): 165-172.

oleh KELOMPOK 4 MIKROTEKNIK KELAS B

sebagai LAPORAN SEDIAAN IRISAN TUMBUHAN METODE PARAFIN

Keterpaksaan

Terkadang
Keterpaksaanlah yang memaksamu untuk menyelesaikan apa yang telah kau mulai
Hingga akhirnya kau melakukan hal terakhir
Menaruh pucuk di atas tajuk berakar
Menaruh loteng di atas bangunan berfondasi
Mencapai garis finish di depan garis start yang jauh jarak keduanya
Dan kau bisa menuai pucuk dan buah, bermain dalam loteng, atau mengambil piala juara itu.
Haruskah keberhasilanmu dipanen dengan keterpaksaan juga?

vidya

Seharusnya

Aku menyesal
Tapi aku menyesal
Seharusnya aku tak menyesal
Seharusnya aku berhenti
Seharusnya kepustusasaan itu datang lebih awal
Seharusnya bukan aku
Seharusnya tak sekarang
Seharusnya ini muncul di saat yang tepat
Seharusnya aku mundur saja
Seharusnya ku tentang mereka
Seharusnya ku tak pilih orang itu
Seharusnya ku tak bersama dia atau mereka
Seharusnya keraguan itu menyeruak keluar
Seharsunya kebingunganku mengalahkan keinginanku
Seharusnya tak ku iyakan
Seharusnya tak ku beri tindakan
Seharusnya tak ku lanjutkan
Seharusnya tak ku tanyakan
Seharusnya tak ku inginkan
Seharusnya tak ku tulis namaku di sana

vidya

Hal "Itu"

Aku tidak suka itu
Aku akan menolak bila harus melakukan itu
Lebih baikaku pergi dari itu
Itu
Hal yang kau sebut biasa itu
Hal yang ku tahu tak baik itu
Hal yang membuatku bertanya itu
Itu
Hal yang tidak ku inginkan itu
Hal yang aku benci itu
Hal yang tak kau tahu aku benci itu
Itu
Sudah ku bilang padamu
Aku bukan kalian atau pun kau
Aku tahu aku
Itu yang membuatku berhenti dan diam
Itu yang membuatku garang
Itu yang seharusnya kutanyakan
Itu yang seharusnya tak ku "Iya"-kan
Itu yang seharusnya ku tinggalkan
Itu yang ingin membuatu berhenti sekarang
Itu kalian

vidya

To: whom it may concern

Ketika angin tak kau rasa
Ketika itu ia bersuara
Tawa muka dalam angin tak bernada
Bukan ocehan tanpa masa
Adakah satu pengikat asa
Bahwa ini tak sia
Adakah satu penguat kata
Biar kita tak berbicara

vidya

I Know Me

Like you saw and heard everything. But you really didn’t.
Like you know myself more than me.
Listen to me carefully, I know myself more than anyone on earth.

Bahkan aku tidak mengeluhkan itu padamu. Kata-kata yang tak akan mengubah keadaan. Kata-kata yang tak akan mengubah apa yang aku rasakan. Aku begini adanya. Aku bukan kamu. Aku adalah aku. Dan aku yang melangkah. Bukan kau atau pun ia yang membuatku melangkah. Aku yang tentukan arah. Aku tahu aku egois. Aku lebih baik dari kamu.

Aku tahu aku, Tuhan tahu aku.

vidya

Spending My Time Thinking (should've been an old post)

Here it is. Again, me with my laptop and the internet connection in the middle of holiday.
Nothing special these days.
Not really, i mean it.
Spending my time, watching movies, learning something from em, lazy-ing on my bed. Really, nothing special.

I was just thinking and remember these guys. Actually, people.
Some of them are having much fun time, lucky time, spending money in it, or not at all. I thought that, "how lucky they are, hope that was me".

But some of them like they were not having heart in it, like half-hearted doing it. Like, i dont know. Like they are not be grateful with that all.
I know one two people like that.

First, i wanted to be like this girl. Strong, perfect, sooo different with me. But she took everything what i wanted to do. She just told everyone she like to do something that i've just told. Then i dont wanna be like her anymore. I dont wanna her strength or something. Then she told that she hate what she had, she didnt want to be there. Then i'm sure, i really dont wanna be like her.
Than second. Theres a guy whose being first skipping classes for something good. He liked it, and enjoyed it. But something in his head like 'he cant do something under pressure'. more if he's in a team, like he's the leader. i dont know, but something in him made us made him the leader. haa! But everything with him ruined. I hate those thing. Till we left him. "Sorry, but youre not helping", i really really wanted to tell him so. but hes gonna ignore me like always. He's so easy to give up something. well i dont know, but so far i notice.

Ledekan Jalan

Kemarin saat mengendarai motor melalui jalan panjang menuju langit biru, tiba-tiba ku lihat seorang anak *stop*
Okay itu lagu salah satu anime masa kecil hahha
Oka, jadi ceritanya kemarin gue ujian pagi jam 9an lah di kampus (iyalah di kampus -.-)
Gue berangkat lewat jalur belakang supaya nggak macet.
Tapi ternyata setelah keluar dan masuk ke jalan raya.
Sepinyaaa nggak keruan Oh My God T-T
"Ini orang-orang sekongkol buat ngeledek gue apa lagi ujian di hari pertama puasa" wk
Biasanya di daerah itu tuh selalu maceeeet banget.
Iya tahu, kemaren hari pertama puasa, libur kali orang-orang institusi lain -_-
Dan yang ujian kemarin kan ga semua mahasiswa, jadi sepi banget kampus. Ketika departemen lain sudah tidak sibuk belajar, departemen gue harus berjuang pada satu mata pelajaran lagi untuk nanti siang (do'akan guuys, semoga kalian juga sukses dalam menggapai cita-cita huwahahaha aamiin)
Dan buat kami yang megambil minor Komunikasi (untuk memenuhi sks), masih ada ujian susulan selasa nanti.
Semangat Yooo! Bisa Yooo!

vidya

Tak Kau Mau Tahu

Ingat ketika orang bertanya milik siapa
Milik siapa penyejuk hati
Rangkaian ulang pembuka mata

Tanpa alunan ia tak tahu
Bahwa tiba pintu dibuka
Lihat suara dalam gelap

Titik cahaya, adakah?
Bara diri tak kau lihat
Karena tak kau mau tahu

vidya
Kutipan hati untuk orang yang ngerasa aja :
kalau nggak ikhlas mah nggak usah
Mainnya itung-itungan mah, gausah

Ga lagi-lagi da, teuing (".--)

vdy
kutipan hati saja :
Ingat ketika mengakui kesalahan yang dibuat orang lain. Pengorbanan atau terlalu bodoh?

-vidya-

Randomaze The Weeks

Open the window, open the web, there I go again. Always cant find the words to say. Always erase what I wrote here. Okay, I just want to tell some words that I cant say to people out there.

#one
First thing first
Say what you need to say. Weather its good or bad for me. Just tell me, dont back up. I'll listen. I won't beg for what my ears really want to hear.

#two
What in the world they're doing. They took and threw it all away.
What in the world they're thinking? Thought that they had just enough to make it alright?
What in the world are they? Are they thinking of being God?

#three
You can seek the for the baaaaad bad reason.
God knows thats the bad reason ever of a liar.

#four
Just give me what I should do. Dont give that to others because THATs my job. Its not about who's the guy.
Daisypath Happy Birthday tickers
Daisypath Halloween tickers